产品介绍

Mono-Glo™ Luciferase Bioassay Kit是一种超高灵敏度、稳定、均质的萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒。本试剂盒中含有高纯度的荧光素(Luciferin)和经过优化的反应试剂，使得反应更加稳定，对环境的耐受性更强。直接在细胞培养物中加入混合后的Mono-Glo检测试剂使细胞裂解，释放出荧光素酶，即可产生如图1所示的反应，发出稳定的光信号。

图1. Mono-Glo检测原理示意

如图2所示，本试剂盒中含有溶液和底物两个组分，将混合后的Mono-Glo™检测试剂等体积加入到细胞培养物中，10 min后即可进行检测。本试剂盒产生的信号强度高，半衰期通常可达30min，且不受酶浓度影响，更适合于对灵敏度有要求的检测试验。

图2. Mono-Glo™操作流程示意

适用范围

本产品适用于基于报告基因的生物活性检测，例如：Fc效应检测、T细胞激活检测、免疫检查点检测、以及细胞因子、生长因子检测等。

实验准备

自备材料

单/多通道移液器；白色/黑色细胞培养板；具有发光检测模块的酶标仪。

操作流程

A、试剂准备

1. 融化：将Mono-Glo™ Luciferase Assay Buffer置于2 ~ 8℃或室温条件下融化，也可将本品放置于22℃水浴融化，但需要注意水温不可超过 25℃。

2. Mono-Glo™检测试剂准备：将融化后的整瓶Mono-Glo™ Luciferase Assay Buffer加入到Mono-Glo™ Luciferase Assay Substrate中，轻柔颠倒混匀3~5次使底物充分溶解。

▲ 使用前，确保Mono-Glo™检测试剂已平衡至室温，若Mono-Glo™检测试剂保存于-20℃或-70℃,融化后，需轻柔颠倒混匀3~5次后使用。

B、检测步骤

1. 于培养箱中取出待测细胞培养板，室温放置30 min，以使培养板温度平衡至室温。

2. 加入与待测细胞培养物等体积并平衡至室温的Mono-Glo检测试剂。例如，使用96孔培养板时，吸取100 μl Mono-Glo检测试剂加入100 μl 待测细胞培养物中。

3. 室温放置至少10 min使细胞充分裂解，即可进行检测。

产品信息

注意事项

1. 发光的强度以及衰减速度取决于荧光素酶的反应速率。温度对酶反应速率有直接影响，因此在加样前，需要将Mono-Glo™检测试剂与细胞培养物均平衡至室温，以确保检测结果的一致性。特别注意在批量操作时，堆叠放置的多孔板比单层放置的多孔板需要更多的时间平衡至室温，未充分平衡可能会引起多孔板温度不均，致使多孔板中心和边缘孔间的梯度效应。

2. Mono-Glo™ Luciferase Bioassay Kit兼容于具有发光检测模块的酶标仪。由于不同酶标仪的设置和灵敏度不同，测得的光信号值也会不同，可能会对检测窗口造成影响。

3. 本产品仅供科学研究使用，不得用于临床医学诊断及其他非合理用途。