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产品介绍
KEL™-ProteinTransfectionReagent是一款性能优良的蛋白转染试剂,可用于不同类型蛋白的胞内递送。它利用疏水、氢键、静电等多重作用力实现蛋白的高效担载,与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围:
KEL™-ProteinTransfectionReagent转染试剂可适用于众多细胞株的蛋白转染。适用于多种贴壁细胞系和悬浮细胞,如HeLa、293T、COS7、CHO、B16F10、RAW264.7、DC2.4、293-F、CHO-S等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
蛋白质的转染步骤:
以12孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1 | 细胞接种:每孔接种1.0~2.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到70~90%融合度 |
2 | 蛋白样本准备:蛋白溶液(0.1mg/mL),转染稀释液(Opti-MEM或无血清培养基)。 |
3 | 转染试剂稀释:涡旋5s,取8µL的KEL™-Protein Transfection Reagent 加入到72μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为80µL |
4 | 复合物制备:将上述20μL蛋白溶液加入到转染试剂稀释液中,吹打均匀后,室温静置10分钟 |
5 | 将上述100µL复合物加入到12孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养4~6小时后检测蛋白转染效率,无需更换培养基 |
蛋白的转染优化:
可通过改变细胞密度、蛋白浓度以及KEL™-ProteinTransfection Reagent 浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在70%以上, KEL™-ProteinTransfection Reagent (µL):蛋白 (µg)可以在1:1和5:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和蛋白的用量
培养板 | 单孔面积 | 接种培养基 | Opti-MEM稀 释后终体积 | 蛋白转染 | |
试剂用量 | 蛋白 | ||||
96孔板 | 0.3cm2 | 200µL | 10µL | 0.4或0.8µL | 0.2µg |
24孔板 | 2.0cm2 | 500µL | 50µL | 2.0或4.0µL | 1.0µg |
12孔板 | 4.0cm2 | 1mL | 100µL | 4.0或8.0µL | 2.0µg |
6孔板 | 10.0cm2 | 2mL | 200µL | 8.0或12.0µL | 4.0µg |
规格/保存条件/效期
| 规格 | 1.5ml |
| 保存条件 | 2-8℃ |
| 效期 | 12个月 |
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