产品介绍

                  一步法 PAGE 快捷制备试剂盒

  产品内容

CAT  #.  KP1820-06/08/10/12/15

分离胶 A  (250ml)      分离胶 B  (250ml)

浓缩胶 A  (100ml)      浓缩胶 B  (100ml  绿色)

Size.125gels

改良型促凝剂（2ml*4）

产品介绍

本产品为聚丙烯酰胺凝胶电泳（  polyacrylamide gel electrophoresis， 简称 PAGE）制备试剂盒，试 剂盒溶液本身不含 SDS，所制备的 PAGE 凝胶可根据电泳缓冲液的不同， 用于变性电泳（SDS-PAGE）和非变 性电泳（Native-PAGE）；试剂盒有 6%、8%、10%、12%、15%五个不同浓度，配有改良型促凝剂，凝胶无需添 加 TEMED，可“一步法”灌胶；本产品选用知名进口品牌高级别试剂作原料，溶液经多重过滤，配置的凝胶 具有高效的蛋白转移能力， 可保证 Western Blot 数据的高度可靠性。

产品特点

>     预混配方， 无需计算所需溶液量， 无需稀释， 只需两种液体等比例混合， 简化传统制胶流程；

>     “一步法”灌胶，灌制分离胶（下层胶）后直接注入浓缩胶（上层胶），无需液封，极大节省制胶时间；

>     浓缩胶呈现彩色（绿）， 点样孔清晰易辨， 方便上样； >     凝胶无需添加 TEMED， 避免恶臭气味， 更加安全；

>     条带清晰， 尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰。

存储方式（按标签要求分开存储）

> 本产品常温运输， 4℃保存， 其中改良型促凝剂需保存于-20℃,  保质期 12 个月。

制胶流程：

1、 取等体积的 分离胶 A 和 分离胶 B 混匀， 体积数量参照附表 1；

2、 取等体积的 浓缩胶 A 和 浓缩胶 B 混匀， 体积数量参照附表 1；

注意： 由于染料的特殊理化性质， 使用前请摇匀；

3、 向步骤  1  的混合溶液（分离胶） 中加入改良型促凝剂（添加量参照附表 1）， 并混合均匀， 然后灌入制

胶玻璃板中；

注意： ①此溶液为过量，请勿全部注入；

②加入改良型促凝剂后需立即混匀， 以免局部凝胶；

4、 向步骤 2  的混合溶液(浓缩胶)中加入改良型促凝剂（添加量参照附表 1）， 并混合均匀，无需等待分离

胶凝固， 即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中， 插入梳齿；

注意： ①灌注浓缩胶溶液一定要轻缓， 避免将浓缩胶溶液冲入分离胶;

②加入改良型促凝剂后需立即混匀， 以免局部凝胶；

5、 待胶凝固后（约 15min）， 拔去梳齿即可用于电泳。

注意： ①请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液；

②胶凝固后上分离胶分界线平整度略弱于传统方法配的胶， 但对后续电泳没有影响；

③凝胶和温度密切相关， 冬天需要更长凝胶时间；

备注：

w  本产品亦适用于“传统制胶”， 即分离胶凝完再灌注浓缩胶；   ⑵  已开盖的改良型促凝剂， 可置于 4℃保存三个月， 效能无变化；

⑶  在配胶之前， 使产品溶液平衡到室温(如室温放置几分钟)， 可有效避免凝胶中气泡的形成；

w  试剂盒提供了 4 支改良型促凝剂（2ml/支）， 方便-20℃保存，避免一整瓶反复冻融影响促凝效果；

⑶  制备好的凝胶可以用去离子水浸湿的纸巾包裹， 并将其储存在一个密封的塑料袋中， 4℃可保存一周。

⑥  每个试剂盒可制备的凝胶数量：

凝胶浓度选择参考

关于电泳电压和电泳时间的说明：

>     蛋白条带的分辨率和电泳美观度，与电泳电压高低相关，相对较低的电压，会跑出分辨率更高更美观的 条带，但相应电泳时间也更长； 本试剂盒最高耐受电压 260V， 推荐电泳电压为 150V—200V；

>     电泳时间长短和电压、胶浓度、缓冲液等因素均相关，建议客户根据自己的实验条件和实验目的选择电 泳电压； 参考电压和时间： 180v 约 50 分钟。

附表 1： 制备胶所需体积列表